午夜夫妻试看120国产,最近中文字幕在线资源,久久这里只有精品无码3d,成人免费看吃奶视频网站

銷售熱線

19126518388
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 消滅 PCR 非特異性擴(kuò)增的方法

    消滅 PCR 非特異性擴(kuò)增的方法

    發(fā)布時(shí)間: 2023-06-28  點(diǎn)擊次數(shù): 2452次
    非特異性擴(kuò)增,即進(jìn)行 PCR 所擴(kuò)增出來的條帶不是所要的,引物與模板在非目的條帶處有錯(cuò)配,導(dǎo)致延伸產(chǎn)物不是目的條帶。例如引物二聚體,即引物在退火過程中產(chǎn)生了 hairpin 結(jié)構(gòu)或其他二級結(jié)構(gòu),或者引物在模板的某些位置非特異性地結(jié)合,也同樣會(huì)產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增。PCR 產(chǎn)物都是通過引物延伸產(chǎn)生的。當(dāng)引物產(chǎn)生了二聚體或者非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物之后,引物本身就無法再延伸形成 PCR 產(chǎn)物了,這樣的情況下,非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物越是多,那目的產(chǎn)物就越是少。如果在 qPCR 過程中,就會(huì)在熔解曲線中形成雙峰。

    消滅 PCR 非特異性擴(kuò)增的方法:
    1、引物設(shè)計(jì)的過程中要用 Primer premier 5.0 來驗(yàn)證一下二聚體;
     
    2、 引物合成后,先做一次梯度 PCR,檢測最合適的退火溫度,一般高退火溫度可以提高引 物對模板的特異性從而降低引物二聚體;
     
    3、 降低 Mg2+濃度,鎂離子濃度高,會(huì)導(dǎo)致大量的非特異性擴(kuò)增,但是沒有鎂離子的話,也會(huì)導(dǎo)致 Taq 酶的失活;
     
    4、降低 dNTP 濃度,dNTP 也是非特異性擴(kuò)增的一個(gè)罪魁禍?zhǔn)祝档退臐舛?,也能有效降低二聚體及其他非特異性擴(kuò)增;
     
    5、降低引物濃度,一般的 PCR 引物都是過量的,降低了引物濃度自然也能降低引物之間形成二級結(jié)構(gòu)的可能性;
     
    6、提高退火溫度,這個(gè)道理很簡單,引物的退火溫度提高,引物間的二級結(jié)構(gòu)形成可能性就會(huì)降低;
     
    7、延長退火時(shí)間,這個(gè)也可以減弱引物間結(jié)合的可能性;
     
    8、DMSO 及甜菜堿,這些 PCR 促進(jìn)劑,主要是用于 CG 含量高的模板上,降低 DNA 的二級結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生,但根據(jù)經(jīng)驗(yàn),加入 DMSO 之后需要同時(shí)提高一點(diǎn)退火溫度來補(bǔ)平(qPCR 不太適用);
     
    9、熱啟動(dòng)法,通過 95℃的高溫?zé)釂?dòng),高溫解鏈,使得引物間的二級結(jié)構(gòu)破壞,以此降低二聚體產(chǎn)生。


    深圳安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術(shù)實(shí)力、壹流的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)。總部設(shè)在廣東,服務(wù)面向全國。安培生物集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供壹流的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、信號傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線,在各個(gè)領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供世界前沿水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品,安培生物致力于為廣大的科研機(jī)構(gòu)、高等院校等優(yōu)質(zhì)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。


產(chǎn)品中心 Products
好男人www免费高清视频在线观看| 中文亚洲av片不卡在线观看| 大香线蕉伊人久久爱| 天堂在线观看www| 亚洲国产精品久久一线不卡| 中文字幕在线观看| 亚洲人成无码网站久久99热国产| 亚洲成av人片在www色猫咪| 国产AV人人夜夜澡人人爽麻豆 | 日韩午夜理论免费TV影院| 给我免费的视频在线观看| 亚洲无码在线播放| 思思99re6国产在线播放| 性无码一区二区三区在线观看| 国模无码视频一区二区三区| 免费少妇a级毛片| 久久久久久久做爰片无码| 国内精品伊人久久久久AV| 人妻互换精品一区二区| 色偷偷色噜噜狠狠成人免费视频| 久久精品国产一区二区三| 999国内精品永久免费视频| 国产成人久久精品激情| 777精品出轨人妻国产| 亚洲aaaa级特黄毛片发布| 国产真人无遮挡作爱免费视频| 少妇一夜十三次精尽人亡 | 久久天堂AV综合合色蜜桃网| 精品一区二区三区四区在线观看| 久久成人国产精品免费软件| 亚洲人成网站观看在线播放 | 最新中文字幕av专区| 国内精品人妻无码久久久影院蜜桃| 淑芬又痒了把腿张开在线视频| 国产精品扒开腿做爽爽爽视频| 粉嫩AV久久一区二区三区| 久久亚洲AV成人无码电影A片| 久久超乳爆乳中文字幕| 免费观看成人欧美WWW色| 妻子的秘密免费读全文| 蜜臀av免费一区二区三区|